? ? ? ?近年來隨著高效液相色譜儀的檢測器靈敏度和色譜柱峰容量的提高，可以在極低濃度下進行檢測，但鬼峰問題卻成為了人們關注的焦點。恒譜生今天就跟大家聊聊鬼峰產生原因和解決措施吧!

一、什么是鬼峰：
? ? ? ?如果化合物出現的時間少于預期的保留時間,則稱為鬼峰”。這將顯示為與注入同一色譜圖的化合物具有不同保留時間的峰。色譜中的鬼峰是在小于預期保留時間的間隔內出現的不需要的峰。這些峰通常是由其他化合物或代謝物與溶劑和固定相的相互作用引|起的,這會導致分離度降低，使評估分離質量變得困難。

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二、鬼峰的來源：

? ? ? 鬼峰的來源通常分為三類：目標物質以外的雜質、LC儀器的內部污染和流動相中的雜質。

(1)?儀器中的雜質

? ? ? 儀器中產生鬼峰的最常見原因是進樣器造成的殘留。當將針頭浸入小瓶中吸取樣品時，樣品中的物質會成為殘留物的來源，因為它們可以吸附到針頭的內外表面。那些即使在針頭沖洗后也沒有被去除的物質被帶到下一個分析中，并以鬼峰的形式出現。由于即使在多次空白分析（僅注入流動相的分析）后也會出現表現出特別強吸附的物質，因此可能很難將自動進樣器識別為鬼峰的來源。

(2)?樣品中的雜質

? ? ? 當樣品中存在與目標化合物吸收波長相同的雜質時，就會產生鬼峰。由于來自樣品的鬼峰不會出現在空白注射中，因此確定來源相對容易。

(3)?流動相中的雜質

? ? ?①流動相中因長時間使用而產生有機物或空氣中的有機物溶解在流動相中

? ? ?②由于長期用新流動相補足現有流動相而不是每天或為每組樣品準備新瓶而導致流動相被污染

? ? ?③使用受污染的有機溶劑和/或水制備流動相

? ? ?④使用受污染的流動相試劑

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三、出現“鬼峰”怎么辦：

? ? ? ?如果早期峰是由于樣品引起的，那么它實際上不是鬼峰，而是分析中需要考慮的真實樣品峰。光散射是表征這些大聚集峰的一個很好的工具，因為即使沒有可用于確定摩爾質量的濃度信號，仍然可以確定大小（RMS 半徑）和數密度。如果樣品中大顆粒的峰滲入其他樣品峰，您可以調整目標樣品峰的基線以排除較大顆粒的貢獻。如果空白注入也能看到鬼峰，那是真正的鬼峰了。

? ? ? ?要消除或防止這些鬼峰：在加載和注入步驟中使用壓力變化最小的 HPLC 系統。請注意，加載期間的壓力僅顯示在前面板上，通常不是 HPLC 數據文件中記錄的數據的一部分。如果鬼峰或系統峰在多次空白注射中可重現，您可以使用 ASTRA 的基線減法程序從樣品注射中減去空白注射的光散射基線。選擇脫落最少的液相色譜柱。逐漸改變流速（不超過 0.1 mL/min2）以防止大的壓力變化沖擊色譜柱。

? ? ? ?恒譜生的鬼峰捕集去除柱（又稱鬼峰捕集小柱）可以有效吸附流動相中的雜質，從而縮短了方法驗證和雜質分析的時間。鬼峰捕集去除柱主要的特點是能夠去除溶劑包括有機溶劑中的雜質。反相色譜梯度分析時，將鬼峰捕集小柱安裝在梯度混合器和自動進樣器之間，不僅能夠去除流動相中的雜質，還可以有效捕集管路和混合器中的雜質。

? ? ? ?今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！