C18 色譜柱是高效液相色譜（HPLC）中最常用的一種色譜柱，它的分離原理基于吸附色譜和分配色譜的原理。

在吸附色譜中，固定相是一種吸附劑，它能夠吸附樣品中的各個組分，使得各個組分在固定相和流動相之間的分配系數不同，從而實現分離。在 C18 色譜柱中，固定相是由硅膠或其他吸附劑表面鍵合了十八烷基（C18）官能團的吸附劑組成的。C18 官能團具有親水性，可以與流動相中的水分子相互作用，從而在流動相和固定相之間形成一層水膜。

當樣品流經 C18 色譜柱時，樣品中的各個組分會與固定相上的 C18 官能團相互作用，使得各個組分在固定相和流動相之間的分配系數不同。分配系數越大的組分，在固定相上的保留時間越長，從而在色譜圖中出現的時間越晚。而分配系數小的組分則會在流動相中更快地移動，在色譜圖中出現的時間越早。

此外，C18 色譜柱還可以通過改變流動相的組成和 pH 值等參數，調節樣品中各個組分與固定相之間的相互作用，從而實現更好的分離效果。例如，在酸性流動相中，弱堿性化合物的保留時間會延長，從而提高它們的分離效率。

總之，C18 色譜柱的分離原理是基于吸附色譜和分配色譜的原理，通過樣品中各個組分與固定相上的 C18 官能團相互作用，實現不同組分的分離。通過改變流動相的組成和 pH 值等參數，可以調節樣品中各個組分的保留時間和分離效率，從而實現更好的分離效果。