HILIC-ZIL兩性離子柱-高效解決極性化合物分離產品

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如何高效分離極性化合物，是眾多化學分離領域從業者非常在意的問題。近年來，由于技術的更新，親水作用色譜（HILIC）在極性化合物分離使用場景越來越多，尤其在核苷類，糖類化合物，有機酸，氨基酸，多肽分析等應用中，能看到各類HILIC柱品牌的使用。

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相對于傳統的反相色譜分離，HILIC具有強極性化合物的洗脫效果，最終分離效果會好很多，這也進一步提高了企業的生產效率，節約生產成本。而在眾多的商業化HILIC柱中，兩性離子型HILIC柱是市場上使用比較多的一款。本文主要給大家介紹HILIC-ZIL兩性離子柱工作原理及分離效果。

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工作原理

從結構上看，HILIC柱的固定相是極性官能團，與正相色譜有點類似，但是HILIC條件流動相中有一定比例的水，而傳統正相色譜體系確實不存在水的。在分離過程中，正相體系下極性化合物容易被吸附在硅膠表面，這類化合物很難被洗脫干凈。而HILIC體系有一個親水層，因此不會出現強吸附問題。

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HILIC柱工作時，其固定相表面的親水作用會建立一個富集水的液體層，分析物就會在流動相和該親水層間進行分配。主要表現為中性的極性化合物與固定相表面的極性基團通過氫鍵作用；易帶電的極性化合物親水層進行離子交換作用；弱極性或非極性化合物通過水與有機相的分配作用。

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固定相和水就形成一層“親水層”。而HILIC對極性化合物的分離機制就取決于固定相結構以及“親水層”的厚度。

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分離效果

HILIC色譜柱的流動相使用的是高濃度極性有機溶劑和水的混合液。有機溶劑常可以選擇乙睛或醇類化合物，水的含量通常為5%以上。

一般來說，0.5-1%含量的水，，就可以形成很厚的“親水層”，從而多層吸附。分析物在“親水層”和流動相之間進行分配。HILIC體系下水相是洗脫相，水相比例的提高有助于強極性化合物進行洗脫，具體洗脫情況如下圖所示。

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規格參數

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以恒譜生uHPLCs公司的HILIC-ZIL兩性離子柱為例，它是以磺酸烷基甜菜堿為功能基的兩性離子柱。

磺酸烷基甜菜堿具有離子對色譜中反離子的作用，磺酸根帶負電荷對帶正電的分析物有靜電作用，甜菜堿帶正電荷對帶負電的分析物有靜電作用，磺酸根在外側，因此對帶正電的化合物靜電作用更強。對于嘌呤和嘧啶等元素有著非常突出的分離效果（具體分離情況如下圖所示）。

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（1）胸腺嘧啶（2）尿嘧啶（3）腺嘌呤（4）鳥嘌呤（5）胞核嘧啶

在實際使用中，由于中溶質、固定相和流動相相互作用及其復雜性，很多分離效果并沒有達到理想狀態，HILIC在極性化合物分離中的顯著效果，可彌補反相色譜的局限性。

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更多分離技術的提高，依賴于技術手段的提高和研發人員的辛勤投入。恒譜生作為專業的儀器耗材供應商，致力于不斷提高色譜柱分離效果與產品質量。

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